沉降菌检测是制药和食品洁净室的必检项目——用来评估空气中微生物自然沉降到产品表面的风险。主要有两种方法：平板暴露法（最常用）和膜过滤法（特殊场景使用）。
平板暴露法（主流方法）
原理：把装有培养基的培养皿打开，放在检测点位，让空气中的微生物自然沉降到培养基表面。暴露一定时间后收回，在培养箱中培养后计数。
| 参数 | 标准要求 |
|---|---|
| 培养基 | TSA（营养琼脂）直径90mm |
| 暴露时间 | 30min（GB标准）/ 4h（EU GMP） |
| 培养温度 | 30-35℃ |
| 培养时间 | ≥48小时 |
| 结果单位 | cfu/皿 |
GMP各级限值：
| 等级 | 限值（cfu/4h皿） |
|---|---|
| A级 | <1 |
| B级 | 5 |
| C级 | 50 |
| D级 | 100 |
平板暴露法的优缺点
| 优点 | 缺点 |
|---|---|
| 简单——不需要设备 | 只能检测可沉降的大粒径微生物 |
| 便宜——培养皿几元/个 | 暴露时间长（尤其4h） |
| 不干扰生产 | 结果受气流方向影响大 |
膜过滤法
膜过滤法不是检测沉降菌的标准方法——但在某些场景可以作为补充：把空气抽过0.45μm的滤膜，微生物被截留在膜上，然后把膜贴到培养基上培养。
适用于需要快速获得结果、或者沉降菌数量极少（A级区域）难以用暴露法检出的场景。
要注意：膜过滤法属于主动采样，测的是空气中的微生物总量，和”自然沉降”是两个概念——用膜过滤的数据去套沉降菌限值是不严谨的，两种方法不能互相替代。
浮游菌和沉降菌的区别
| 维度 | 沉降菌 | 浮游菌 |
|---|---|---|
| 检测原理 | 自然沉降 | 主动抽吸 |
| 设备 | 培养皿 | 浮游菌采样器 |
| 代表意义 | 微生物沉降到产品的风险 | 空气中微生物总量 |
| 灵敏度 | 低（漏掉小粒径的） | 高 |
两种方法互补使用——GMP要求同时做沉降菌和浮游菌检测。
采样现场怎么做：操作清单
沉降菌检测的结果，很大程度上取决于现场操作是否规范。一份可直接照做的清单：
| 步骤 | 要求 | 依据 |
|---|---|---|
| 采样前预运行 | 净化空调系统先运行：单向流≥10min，非单向流≥30min | 洁净室检测认证实践（《空气洁净技术》第八章） |
| 采样人员 | 不超过2人，穿洁净服 | 同上 |
| 布点 | 避开送风口正下方和门边气流短路区，按验证过的布点图执行 | 布点陷阱见沉降菌检测陷阱 |
| 暴露操作 | 开盖后不再移动培养皿，放在台面或支架上 | 操作规范·经验建议 |
| 培养计数 | 按SOP规定的温度和时间培养，计数并记录 | 各企业培养规程 |
最容易翻车的是第一条：系统没运行够时间就采样，本底粒子还没被稀释冲刷干净，结果虚高，白白触发一轮排查。另一个常被忽略的点——采样时培养皿要放在台面或支架上，不能拿在手里举着，人本身就是一个散发源。
结果判读和超标处置
检出菌落不等于不合格，先核对三点：布点是否符合验证方案、暴露时间是否准确、培养计数是否按规程执行。确认超标后的标准处置顺序是：
- 彻底清洁该点位及周围区域
- 净化系统继续运行，达到自净时间后重新检测
- 复测仍超标，再查空调系统：高效过滤器检漏、压差、换气次数
- 必要时加大该房间正压和换气次数，直至复测达标
不要一上来就换过滤器——沉降菌超标的人为因素（采样不规范、清洁不到位）比过滤器失效更常见。从数据回到现场的排查路径，可以参考浮游菌超标排查。
关于沉降菌暴露位置的选择，可以看沉降菌检测陷阱。关于浮游菌超标排查，可以看浮游菌超标排查。布点和结果判读的完整标准流程，可以看沉降菌检测标准和操作方法。整体的洁净工程规划，建议从总览页面了解全貌。
常见问题
沉降菌和平板暴露法是什么关系？
包含关系。沉降菌是一个检测项目，测的是微生物自然沉降到产品的风险；平板暴露法是它最常用的实现方法。所以问”沉降菌检测方法有几种”，严格说是在问实现这个项目有几种手段——平板暴露法是标准方法，膜过滤法等只能算补充。
暴露30分钟和暴露4小时，结果能换算吗？
不能线性换算。沉降不是匀速过程，粒径不同沉降速率不同，气流扰动的影响也随时间变化。GB 口径的30min和EU GMP 口径的4h各有配套的限值体系，检出数要和对应暴露时间下的限值比，不能互相折算。
沉降菌合格但浮游菌超标，说明什么？
说明空气中悬浮的微生物偏多，但可沉降部分不多——污染源更可能来自人体（皮屑、呼吸道微生物）或空调系统本身，而不是粗颗粒扬尘。两个指标的对比比单个数值更有诊断价值，排查时优先查人员操作和新风过滤。
